Práctica 5. Determinación cuantitativa de glucosa. Glucosa-TR 17/10/2019

OBJETIVOS

• El objetivo de esta práctica es determinar cuantitativamente el nivel de glucosa en suero o plasma.
  

UTILIDAD CLÍNICA

• La glucosa es la mayor fuente de energía para las células del organismo; la insulina falicita la entrada de glucosa en las células.
• La diabetes mellitus es una enfermedad que cursa con una hiperglucemia, causada por un déficit de insulina.
• El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

FUNDAMENTOS

• La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidación de glucosa a ácido glucónico. El peródixo de hidrógeno ( H₂O₂), producido se detecta mediante un aceptor cromogénico de oxígeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD)

APARATOS

Espectrofotómetro, es muy importante encenderlo unos 15 minutos antes de comenzar a utilizarlo

MATERIALES

Pipeta automática y puntas desechables

Gradilla con tubos de ensayo y tapones

Soporte para cubetas y cubetas de espectrofotometría de vol: 1 cm

REACTIVOS

Reactivo de trabajo, preparado disolviendo R2 en R1

Glucosa CAL

MUESTRA

Suero

PROCEDIMIENTO

• Preparamos blanco, patrón y muestra

1. Preparamos en tubos: blanco, patrón y muestra siguiendo las indicaciones:
   

• Técnica

1. Debemos mezclar e incubar los tubos preparados en el paso anterior 10 minutos a 37ºC.
   
2. Ajustamos el espectrofotómetro a cero utilizando el blanco.
3. Leemos la absorbancia del patrón y la muestra frente al blanco de reactivo. El color es estable como mínimo 30 minutos.
   

   

   Muestra

RESULTADOS

• Resultados obtenidos:
• Patrón: 0,353 A
• Muestra: 0,832 A
• Aplicamos la fórmula:
  
• Obtenemos un resultado correcto: 235,69 mg/dL de glucosa en la muestra.