Práctica 15. Determinación cuantitativa de triglicéridos

OBJETIVOS

El objetivo de esta práctica es realizar una determinación cuantitativa de triglicéridos en suero humano.

Los triglicéridos son grasas que seuministran energía a la célula. Al igual que el colestero, son transportados a las células del organismo por las lipoproteínas en la sangre.
Una dieta alta en grasas saturadas o carbohidratos puede elevar los niveles de triglicéridos.
Su aumento es relativamente inespecífico. Diversas dolencias, como ciertas disfunciones hepáticas o diabetes mellitus, pueden estar asociadas con su elevación.

Los trigliceridos incubados con lipoproteinlipasa liberan glicerol y ácidos grasos libres. El glicerol es fosfolirado por glicerolfosfato deshidrogenasa y ATP en presencia de glicerol quinasa para producir glicerol-3-fosfato y adenosina-5-difosfato. El G3P es entonces convertido a dihidroxicetona fosfato y peróxido de hidrógeno por GPO.
El peróxido de hidrógeno reacciona con 4-aminofenazona y p-clorofenol, reacción catalizada por la proxidasa dando una coloración roja.

Pipeteamos en una cubeta:
Mezclamos eincubamos 5 minutos a 37ºC.
Leemos la absorbancia del patrón y la muestra, frente al blanco de reactivo, con el espectrofotómetro ajustado a 505 nm. El color es estable como mínimo durante 30 minutos.