Práctica 17. Determinación cuantitativa de colesterol HDL 29/01/2020

OBJETIVOS

• El objetivo de esta práctica es realizar una determinación cuantitativa de colesterol HDL en suero humano.

UTILIDAD CLÍNICA

• Las partículas de HDL son lipoproteínas de alta densidad que transportan el colesterol desde los tejidos del cuerpo hasta el hígado. Debido a que las HDL pueden retirar el colesterol de las arterias y transportarlo de vuelta al hígado para su excreción, se les conoce como el colesterol o lipoproteína buena.
• Un nivel bajo de colesterol HDL es considerado uno de los principales factores de riesgo cardiovascular y enfermedades de las arterias coronarias.

FUNDAMENTOS

• Determinación dirante del HDLc sin necesidad de pre-tratamiento o centrifugado de la muestra.
• La determinación se realiza en dos pasos:
• Eliminación de lipoproteínas no-HDL.
• Medición de HDLc.

MATERIALES

Micropipeta

Cubetas electroforesis

Puntas micropipeta

Tubos

REACTIVOS

HDL

Calibrador

MUESTRA

Suero

APARATOS

Fotómetro

PROCEDIMIENTO

1. Pipeteamos en una cubeta:
   
2. Mezclamos e incubatos a 37ºC y leemos la absorbancia (A1) del calibrador y la muestra.
1. Calibrador: 0,022 A.
2. Muestra: 0,007 A.
   
3. Añadimos:
   
4. Mezclamos e incubamos 5 minutos a 37ºC y leemos la absorbancia (A2) frente al blanco de reactivo.
1. Calibrador: 0,024 A.
2. Muestra: 0,042 A.

RESULTADOS

• No ha sido posible obtener un resultado correcto, ya que no se puede medir en el espectrofotómetro volúmenes tan pequeños en las cubetas que utilizamos en clase.
• Los resultados obtenidos en el fotómetro eran negativos.