Práctica 18. Determinación cuantitativa de creatinina 30/01/2020

OBJETIVOS

  • El objetivo de esta práctica es realizar una determinación cuantitativa de creatinina en suero humano.

UTILIDAD CLÍNICA

  • La cratinina es el resultado de la degradación de la creatina, componente de los músculos y puede ser transformada en ATP, fuente de energía para las células.
  • La producción de creatinina depende de la modificación de la masa muscular.
  • Se elimina a través del riñón. En una insuficiencia renal progresiva hay una retención en sangre de urea, creatinina y ácido úrico.

FUNDAMENTOS

  • El ensayo de la cretinina está basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito por Jaffe.
  • La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. El intervalo de tiempo escogido para las lecturas permite eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método.
  • La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra ensayada.

MATERIALES
Micropipeta
Cubetas electroforesis
Puntas micropipeta
Tubos

REACTIVOS
R1 y R2
Calibrador

MUESTRA
Suero

APARATOS
Fotómetro

PROCEDIMIENTO

  1. Pipeteamos en una cubeta:
  2. Mezclamos y ponemos en marcha el cronómetro.
  3. Leemos la absorbancia (A1) al cabo de 30 segundos, y al cabo de 90 segundos (A2) de la adición de la muestra.
    1. Muestra:
      1. A1. 0,132 A.
      2. A2. 0,183 A.
    2. Patrón:
      1. A1. 0,007 A.
      2. A2. 0,040 A.

RESULTADOS

  • Aplicamos la fórmula:
  • Obtenemos que el resultado es correcto.

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