Práctica 20. Bilirrubina Directa

OBJETIVOS

  • El objetivo de esta práctica es realizar una determinación cuantitativa de bilirrubina en suero humano.

UTILIDAD CLÍNICA

  • La bilirrubina se origina por la degradación de la hemoglobina. Es transportada del bazo al hígado y se excreta en la bilis.La hiperbilirrubinemia es el resultado de un incremento de la bilirrubina en plasma. 
  • El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio

FUNDAMENTOS

  • La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado midiéndose fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suero, sçolo la bilirrubin-glucorónido reacciona en medio acuoso precisando la bilirrubina libre ligada a la albúmina la solubilización con dimetilsulfóxido para que reaccione.
  • La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de bilirrubina presente en la muestra ensayada.

MATERIALES
Tubos y tapones
Micropipeta
Cubetas electroforesis
Puntas micropipeta

REACTIVOS

APARATOS
Fotómetro

PROCEDIMIENTO

  1. Pipeteamos en una cubeta:
  2. Mezclamos y ponemos en marcha el cronómetro.
  3. Leemos la absorbancia tras incubar durante exactamente 5 minutos a temperatura ambiente.
    1. Muestra: 0,086 A.
    2. Patrón: 0,122 A.

RESULTADOS

  • Aplicamos la fórmula:
  • Obtenemos que el resultado es correcto.

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